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Twist Bioscience公司推出的FlexPrep? 超高通量文庫制備試劑盒，通過引入新穎的 Normalization by Ligation ? (NBL) 技術(shù)，改進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)酶促片段化文庫制備方法，以低成本實現(xiàn)高通量，旨在加速芯片用戶在群體基因組學(xué)和農(nóng)業(yè)基因組學(xué)領(lǐng)域的NGS研究。
Twist FlexPrep? 超高通量(UHT)文庫制備試劑盒
Twist FlexPrep ? 超高通量（UHT）文庫制備試劑盒的工作流程旨在為簡化和大規(guī)模擴(kuò)展 Twist 已建立的酶切方法而設(shè)計。Normalization by Ligation ? (NBL) 技術(shù)消除了在文庫制備前對每個DNA樣本進(jìn)行定量和對大量人工耗費的需要，從而大大節(jié)省了每個樣本的成本。在多孔板中對每個樣本進(jìn)行片段化和接頭連接后，*多可以將12個樣本合并到一個管中，顯著減少后續(xù)磁珠純化和擴(kuò)增步驟所需的試劑用量和成本?？衫么嗽噭┖兄苽涞奈膸?，使用靶向富集組合進(jìn)行全基因組或靶向測序。所有多孔板和管式都經(jīng)過優(yōu)化，以確保與關(guān)鍵自動化系統(tǒng)兼容，這對于希望簡化工作流程并減少動手時間的實驗室來說是一個關(guān)鍵考慮因素。
關(guān)鍵優(yōu)勢
集成的NBL技術(shù)
? 消除前期歸一化處理
? 無需中間定量
? 樣品起始量區(qū)間寬泛（30ng-300ng）
早期混樣節(jié)省成本
? 接頭連接反應(yīng)之后將96個樣本合并到8管中
? 降低上游反應(yīng)體積
? 減少下游反應(yīng)耗材
專為超高容量多重測序而生
? 單個試劑盒多達(dá)1152個UDIs
? 反應(yīng)數(shù)量擴(kuò)大12倍
? 每個靶向富集反應(yīng)可支持96個樣本
數(shù)據(jù)展示
消除前期歸一化和中間定量樣品
Twist FlexPrep UHT文庫制備試劑盒采用新穎的 Normalization by Ligation（NBL）技術(shù)，消除了前期和中間樣品定量的需要，簡化了測序工作流程（圖1）。
專為節(jié)省成本且不影響質(zhì)量而構(gòu)建的工作流程
FlexPrep標(biāo)準(zhǔn)化接頭包含12個內(nèi)聯(lián)條形碼，它允許超高通量和自動化友好的多重測序策略（圖2）。
Twist FlexPrep UHT文庫制備試劑盒，通過在一個試劑盒的單次測序中運行多達(dá)1152個樣本來實現(xiàn)測序通量*大化，這種提高效率的策略可以轉(zhuǎn)化為節(jié)省試劑、耗材和時間成本。與單獨處理樣本相比，F(xiàn)lexPrep?將使用的耗材減少了12倍，并將移液器吸頭的數(shù)量從標(biāo)準(zhǔn)試劑盒中使用的17,000多個減少到FlexPrep? UHT試劑盒中使用的不到4,000個。
Twist FlexPrep UHT產(chǎn)量均一，且插入片段尺寸穩(wěn)定
Twist FlexPrep UHT Library Preparation Kit支持30 ng至300 ng的起始量范圍，對全基因組測序（WGS）或靶向富集（TE）的均勻性和插入片段尺寸的影響*?。ㄈ鐖D3和圖4）。
通過靶向富集確定感興趣區(qū)域
FlexPrep的工作流程也可以擴(kuò)展到靶向富集，其中單個富集反應(yīng)可用于多達(dá)96個樣品。
與其他Twist文庫制備試劑盒一樣，F(xiàn)lexPrep UHT生成的高復(fù)雜性文庫在靶向富集后具有均勻的覆蓋率（表1）。結(jié)合Twsit定制Panel，以實現(xiàn)對感興趣的基因組區(qū)域的可調(diào)控且均勻的覆蓋。
