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下一代測(cè)序技術(shù)（NGS）的快速發(fā)展，讓精準(zhǔn)醫(yī)療、生命科學(xué)研究邁入全新維度。而在這背后，離不開(kāi)實(shí)驗(yàn)室里那些“低調(diào)的硬核設(shè)備”。本期?？?，我們將帶您走進(jìn)NGS實(shí)驗(yàn)全流程，揭開(kāi)核心儀器設(shè)備的神秘面紗——它們?nèi)绾螀f(xié)同作戰(zhàn)，將樣本轉(zhuǎn)化為海量基因數(shù)據(jù)？

NGS實(shí)驗(yàn)流程

01、樣品制備及提取

02、樣品質(zhì)檢

03、文庫(kù)構(gòu)建

04、文庫(kù)質(zhì)檢定量

05、測(cè)序及驗(yàn)證

01樣本制備提?。壕珳?zhǔn)的“起跑線”

組織研磨/均質(zhì)儀

充分研磨樣品，應(yīng)用于對(duì)生物樣品的DNA提取實(shí)驗(yàn)分析，確保樣品前處理的理想效果；

核酸提取儀

高效提取DNA/RNA，確保樣本純度與完整性。

關(guān)鍵指標(biāo)：通量（單批次處理樣本數(shù)）、兼容性（血液、組織、FFPE等樣本類型）

02文庫(kù)構(gòu)建：從“原料”到“標(biāo)準(zhǔn)化產(chǎn)品”

片段化設(shè)備—超聲破碎儀

聲波能量將DNA剪切至特定長(zhǎng)度。

真空離心濃縮儀

高效去除樣品中的溶劑，同時(shí)保護(hù)樣品的生物活性和化學(xué)結(jié)構(gòu)，確保文庫(kù)構(gòu)建的質(zhì)量和效率。

自動(dòng)化建庫(kù)工作站

優(yōu)勢(shì)：減少人為誤差，實(shí)現(xiàn)末端修復(fù)、加接頭、PCR擴(kuò)增等步驟的全流程自動(dòng)化。

適用場(chǎng)景：大規(guī)模臨床檢測(cè)或高通量研究項(xiàng)目。

PCR儀

核心任務(wù)：擴(kuò)增文庫(kù)，增加測(cè)序信號(hào)強(qiáng)度。

選擇要點(diǎn)：溫控精度、升降溫速度（影響擴(kuò)增效率）。

03測(cè)序儀：數(shù)據(jù)生產(chǎn)的“超級(jí)引擎”

主流測(cè)序平臺(tái)

Illumina ：通量王者，單次運(yùn)行可產(chǎn)出6Tb數(shù)據(jù)，適合全基因組測(cè)序或大規(guī)模隊(duì)列研究。

MGI ：國(guó)產(chǎn)標(biāo)桿，超高通量+低成本，強(qiáng)勢(shì)進(jìn)軍臨床市場(chǎng)。

04質(zhì)控與驗(yàn)證：不容忽視的細(xì)節(jié)

質(zhì)檢（樣品質(zhì)檢/文庫(kù)質(zhì)檢）：

1、Qubit熒光定量?jī)x，確保核酸濃度符合建庫(kù)要求。

2、凝膠電泳：評(píng)估DNA片段的大小分布和質(zhì)量

數(shù)字PCR（ddPCR）

**定量文庫(kù)濃度，避免測(cè)序失?。灰约皩?duì)測(cè)序結(jié)果的驗(yàn)證。

05其他設(shè)備，小身軀大能量

離心機(jī)、混勻儀、金屬浴、磁力架、移液器等；

NGS實(shí)驗(yàn)的成功，既需要“高精尖”設(shè)備的加持，更離不開(kāi)對(duì)應(yīng)用場(chǎng)景的精準(zhǔn)匹配：

臨床診斷：優(yōu)先考慮自動(dòng)化、合規(guī)性。

科研探索：側(cè)重靈活性和技術(shù)前沿性。

成本敏感場(chǎng)景：關(guān)注國(guó)產(chǎn)替代。